遷移
▼ 服務(wù)介紹
【實驗原理】
細胞遷移即細胞劃痕法，是測定細胞遷移運動與修復(fù)能力的方法，類似體外傷口愈合模型。在體外培養(yǎng)皿或平板培養(yǎng)的單層貼壁細胞上，用微量槍頭或其他硬物在細胞生長的中央?yún)^(qū)域劃線，去除中央部分的細胞，然后繼續(xù)培養(yǎng)細胞至實驗設(shè)定的時間，取出細胞培養(yǎng)板，觀察周邊細胞是否生長至中央劃痕區(qū)，以此判斷細胞的生長遷移能力，實驗通常需設(shè)定正常對照組和實驗組，實驗組是加了某種處理因素或藥物、外源性基因等組別，通過不同分組之間的細胞對于劃痕區(qū)的修復(fù)能力，可以判斷各組細胞的遷移與修復(fù)能力。當細胞長到融合成單層狀態(tài)時，在融合的單層細胞上人為制造一個空白區(qū)域，稱為“劃痕”。劃痕邊緣的細胞會逐漸進入空白區(qū)域使“劃痕”愈合。
【實驗步驟】
1、培養(yǎng)板接種細胞之前先用marker筆在12孔板背面畫橫線標記（方便拍照時定位同一個視野）。
2、細胞消化后接入12孔板，數(shù)量以貼壁后鋪滿板底為宜（數(shù)量少時可培養(yǎng)一段時間至鋪滿板底）。
3、細胞鋪滿板底后，用1ml槍頭垂直于孔板制造細胞劃痕，盡量保證各個劃痕寬度一致。（人工槍頭制造劃痕難以保證劃痕寬度的一致性，影響實驗結(jié)果，這也是該方法最大的缺陷）。
4、吸去細胞培養(yǎng)液，用PBS沖洗孔板三次，洗去劃痕產(chǎn)生的細胞碎片。
5、加入無血清培養(yǎng)基，拍照記錄。
6、將培養(yǎng)板放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)，每隔4-6小時取出拍照。
7、根據(jù)收集圖片數(shù)據(jù)分析實驗結(jié)果。
【常見問題和注意事項】
在進行細胞遷移實驗時，需要注意以下幾點：
（1）實驗前應(yīng)充分了解所選用的方法和實驗步驟，避免操作不當或誤操作導(dǎo)致結(jié)果不準確。
（2）實驗中應(yīng)注意細胞的狀態(tài)和培養(yǎng)條件，如培養(yǎng)基的溫度、濕度和pH值等。
（3）實驗中應(yīng)遵循安全操作規(guī)程，如佩戴手套和口罩等。
（4）實驗結(jié)束后應(yīng)及時清理實驗器材和廢棄物，避免對環(huán)境造成污染。
【交付標準】
1. 實驗報告
2. 真實實驗結(jié)果
3. 原始圖片
4. 實驗原始數(shù)據(jù)
5. 剩余物料在周期內(nèi)可返還（超過周期，不予返還）
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